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Pin1siRNA对宫颈癌细胞SiHa增殖和凋亡的影响

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医学论坛网 2014-2-19 阅读 字号:T|T

  近日,同济大学附属东方医院妇产科研究人员发表论文,旨在通过小干扰RNA(siRNA)载体介导抑制肽基脯氨酰同分异构酶(Pin1)表达,探讨Pin1对宫颈癌细胞SiHa增殖与凋亡的影响。研究指出,RNA干扰技术能特异高效的抑制Pin1基因的表达,Pin1基因的下调能抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,提示Pin1可能成为治疗宫颈癌的新靶点。该文发表在2013年第10期《现代妇产科进展》杂志上。

  构建pGPU6/GFP/ Neo-Pin1 siRNA表达载体,脂质体介导将其转染至宫颈癌细胞SiHa中;实验设3组:实验组(SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组)、阴性对照组(SiHa/pGPU6-con组)和空白对照组(SiHa)。采用RT-PCR、Western blot法检测Pin1的表达;MTT法检测细胞增殖活性;原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。

  转染SiHa/pGPU6-Pin1siRNA的SiHa细胞中,Pin1 mRNA和蛋白表达分别下调68.1%和54.8%,细胞增殖显著抑制。TUNEL显示典型细胞凋亡特征,SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的凋亡指数(AI)为(29.6±14.58)%,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(8.44±5.65)%]和空白对照组[(5.34±4.47)%](P<0.05)。SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的细胞凋亡率为(30.95±16.47)%,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(6.18±6.10)%]和空白对照组[(5.95±4.99)%](P<0.05)。< span="">

 

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